產品名稱:酸性蛋白酶(ACP)活性檢測試劑盒
產品型號:BC2280
產品特點:酸性蛋白酶(ACP)活性檢測試劑盒測定意義:CP是一種在酸性環境下催化蛋白質水解的酶。該酶主要用于酒精發酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
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酸性蛋白酶(ACP)活性檢測試劑盒
產品規格:50管/24樣 產品商標:solarbio
保存與運輸:4℃保存或-20℃保存; 參考價格:650
庫存狀態:現貨
關鍵字: 酸性蛋白酶檢測試劑盒|ACP檢測試劑盒|酸性蛋白酶|試劑盒
簡要介紹:
CP是一種在酸性環境下催化蛋白質水解的酶。該酶主要用于酒精發酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;鎢藍在680nm有特征吸收峰,通過測定其吸光度增加,來計算ACP活性。
產品詳細描述
產品內容:
提取液:液體35mL×1瓶,4℃保存。
試劑一:粉劑×1瓶,4℃保存。臨用前加10 mL蒸餾水溶解。
試劑二:粉劑×1瓶,4℃避光保存。臨用前加入10 mL提取液,沸水浴中磁力攪拌溶解。
試劑三:液體50ml×1瓶,4℃保存。
試劑四:液體10mL×1瓶,4℃保存。
標準品:液體1ml×1支,0.25 μ mol/mL標準酪氨酸溶液,4℃保存。
產品說明:
ACP是一種在酸性環境下催化蛋白質水解的酶。該酶主要用于酒精發酵、啤酒釀造、毛皮軟化、果酒澄清、醬油釀造、飼料等。
酸性條件下,ACP催化酪蛋白水解產生酪氨酸;在堿性條件下,酪氨酸還原磷鉬酸化合物生成鎢藍;鎢藍在680nm有特征吸收峰,通過測定其吸光度增加,來計算ACP活性。
試驗所需自備儀器和樣品:
研缽、臺式離心機、可見分光光度計、水浴鍋、磁力攪拌器、可調式移液槍、1mL玻璃比色皿、1.5 mL EP管和蒸餾水。
操作步驟:
一、粗酶液提取:
稱約0.1g組織,加入1mL提取液,冰上充分研磨,10000rpm 4℃離心10min,取上清,即粗酶液,置冰上待測。或直接稱取0.1g酶制品,加入1mL提取液,置冰上待測。
二、測定:
1.分光光度計預熱30min以上,調節波長到680 nm,蒸餾水調零。
2.試劑一、試劑二和試劑三置于30℃水浴保溫30min以上。
3.樣本測定(在1.5mLEP管中依次加入下列試劑)
試劑名稱(µL) | 對照管 | 測定管 | 空白管 | 標準管 |
粗酶液 | 100 | 100 | ||
試劑一 | 200 | |||
試劑二 | 200 | |||
混勻后30℃水浴保溫10min | ||||
試劑一 | 200 | |||
試劑二 | 200 | |||
混勻后10000rpm 4℃離心10min,取上清 | ||||
上清 | 200 | 200 | ||
蒸餾水 | 200 | |||
標準品 | 200 | |||
試劑三 | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
試劑四 | 200 | 200 | 200 | 200 |
混勻后30℃水浴保溫20min |
取1mL于1mL玻璃比色皿中,在680nm測定光吸收,分別記為A對照管、A測定管、A空白管、A標準管。
三、酸性蛋白酶活性計算:
(1)按蛋白濃度計算
ACP活性單位(U)定義:30℃每毫克蛋白每分鐘催化水解產生1μmol酪氨酸
ACP活性(U/mg prot)
=C標準品×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)×V1÷(Cpr×V2)÷T
=0.125×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷Cpr
(2)按樣本鮮重計算
AP活性單位(U)定義:30℃每克樣品每分鐘催化水解產生1 μ mol酪氨酸。
AP活性(U/g)
=C標準品×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)×V1÷(W×V2÷V3)÷T
=0.125×(A測定管-A對照管)÷(A標準管-A空白管)÷W
C標準品:0.25 μ mol/mL標準酪氨酸溶液; Cpr:粗酶液蛋白質濃度(mg/mL);W:樣品質量(g);V1:酶促反應總體積(mL),0.5mL;V2:加入反應體系中粗酶液體積(mL),0.1 mL;V3:粗酶液總體積(mL),1mL;T:催化反應時間(min),10min。
注意:若反應較弱,(A測定管-A對照管)差值較小,可適當延長反應時間(20-30min),即第1步水浴時間,后計算酶活時對公式進行修改。
相關文獻:
《Hematopoietic Substrate-1-Associated Protein X-1 Regulates the Proliferation and Apoptosis of Endothelial Progenitor Cells Through Akt Pathway Modulation》 作者:XIN-BIN GUO,XIN DENG,YING WEI 期刊:Wiley Online Library 影響因子: PMID:29139175
《MicroRNA?93?5p increases multidrug resistance in human colorectal carcinoma cells by downregulating cyclin dependent kinase inhibitor 1A gene expression》 作者:Shi?Jun Wang, Yun?Fei Cao, Zu?Qing Yang, Zhi?Yuan Jiang, Bin Cai, Jiao Guo, Sen Zhang, Xiao?Long Zhang, Feng Gao 期刊:Oncology Letters 影響因子:0.237 PMID:
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