1. 打開(kāi)試劑盒，對(duì)照說(shuō)明書(shū)逐一取出各個(gè)試劑，了解各試劑的狀態(tài)和規(guī)格。
2. 通讀說(shuō)明書(shū)，準(zhǔn)備好實(shí)驗(yàn)所需儀器、用具（酶標(biāo)儀/分光光度計(jì)；金屬浴/水浴鍋；渦旋振蕩儀；96孔板/1mL比色皿等）。
提示：建議在試驗(yàn)前通讀一遍說(shuō)明書(shū)，了解實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)，提前設(shè)置好實(shí)驗(yàn)所需溫度。
3.進(jìn)行樣本采集和存儲(chǔ)。生化試劑盒實(shí)驗(yàn)多數(shù)為酶活測(cè)定或含量測(cè)定實(shí)驗(yàn)，采集后的樣本建議在-20℃以下低溫保存。
4.按照說(shuō)明書(shū)進(jìn)行樣本前處理，詳細(xì)的樣本處理步驟大家可以參考B站上我們樣本前處理的視頻。
提示：提取后的樣本上清液建議在當(dāng)天使用完，現(xiàn)用現(xiàn)配（反復(fù)凍融會(huì)影響樣本酶活或含量）。
5.按照說(shuō)明書(shū)測(cè)定步驟，依次加入各個(gè)試劑。
提示：為確保反應(yīng)進(jìn)行，建議按照說(shuō)明書(shū)加樣表依次加入各個(gè)試劑，（有些試劑盒加樣順序可能會(huì)影響反應(yīng)）。
6.依次加入各個(gè)試劑后建議充分混勻，以確保顯色反應(yīng)完。
提示：為確保顯色反應(yīng)完，必須保證反應(yīng)溫度和反應(yīng)時(shí)間準(zhǔn)確，注意是否為避光實(shí)驗(yàn)。
7.反應(yīng)結(jié)束后，在酶標(biāo)儀或分光光度計(jì)上進(jìn)行測(cè)定，并按照說(shuō)明書(shū)計(jì)算公式進(jìn)行計(jì)算、分析。
提示：反應(yīng)結(jié)束后應(yīng)立即測(cè)定，有些試劑盒反應(yīng)結(jié)束后需要在短時(shí)間內(nèi)進(jìn)行測(cè)定，時(shí)間過(guò)久可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
1. 實(shí)驗(yàn)前，建議通讀說(shuō)明書(shū)，了解實(shí)驗(yàn)各個(gè)步驟，并挑選2-3個(gè)樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)。
2. 實(shí)驗(yàn)前確定使用的儀器用具，如玻璃比色皿/石英比色皿；96孔普通版/96孔UV板/96孔石英板（尤其注意最終反應(yīng)液溶劑是否為有機(jī)試劑，是否可用塑料材質(zhì)的96孔板）。
3. 實(shí)驗(yàn)前按照說(shuō)明書(shū)溶液的配制，將各個(gè)試劑進(jìn)行充分溶解，-20℃保存的試劑建議分裝后保存，避免反復(fù)凍融；現(xiàn)配現(xiàn)用的試劑，建議根據(jù)樣本量進(jìn)行計(jì)算后配制使用。
4. 如果樣本吸光值超過(guò)線性范圍，可以增加樣本量、延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間或者稀釋樣本后再進(jìn)行測(cè)定，注意同步修改計(jì)算公式。
5. 如需按照蛋白濃度進(jìn)行計(jì)算，建議查看說(shuō)明書(shū)注意事項(xiàng)，確定本試劑盒提取的上清液是否可以用于蛋白濃度測(cè)定，若提取液中含有蛋白質(zhì)沉淀劑或前處理過(guò)程使蛋白變性，需另取樣本測(cè)定蛋白濃度。
6. 若樣本量過(guò)多，建議分批次進(jìn)行實(shí)驗(yàn)；連續(xù)幾天進(jìn)行測(cè)定時(shí)，確保試劑、儀器和操作步驟一致，避免儀器和人工誤差。
提示：各個(gè)試劑盒因?qū)嶒?yàn)原理，測(cè)定方法各有差異，建議實(shí)驗(yàn)前認(rèn)真閱讀該試劑盒的注意事項(xiàng)。
